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而TLC的原理就是利用不同化合物在同一展開(kāi)劑中在硅膠板上吸附和解吸附的的不同從而加以區(qū)分，如下圖：TLC監(jiān)測(cè)一般遵循以下步驟：1、觀察反應(yīng)液是否要處理？

有機(jī)新手如何裝好柱子

化學(xué)實(shí)驗(yàn)畢竟是有危險(xiǎn)的，要時(shí)時(shí)注意特別要規(guī)范操作，在沒(méi)有弄明白之前，最好不要輕易動(dòng)手。所以做實(shí)驗(yàn)室且不可大意，還是小心謹(jǐn)慎為好。NO32、在作中藥材薄層層析時(shí)，很多藥材因?yàn)楹�有羧基或者氨基�?huì)造成跑板拖尾現(xiàn)象或者重疊，這將難以和標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì)。

反相硅膠是在正相硅膠(普通硅膠，官能團(tuán)為OH)的基礎(chǔ)上進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)把OH取代為OR(R是碳?xì)滏溁蚍Q作碳鏈，CH)的硅膠。

TLC是有機(jī)化學(xué)工作者必不可少的工具之一，也可以說(shuō)是合成工作者的雙眼，利用TLC能夠跟蹤反應(yīng)、定性、定量、摸索和確定柱層析時(shí)的洗脫條等等。顯色劑是實(shí)現(xiàn)TLC肉眼可見(jiàn)的重要物質(zhì)，好的顯色劑不但能夠讓你工作更加效率，更多的有可能幫助你減少失誤。
顯色劑種類很多，用途也各有千秋，比如茚三酮適合含氮的（仲、伯）氮化合物；碘能使大多數(shù)化合物顯色，尤其是含氮化合物（有些酰胺是不靈敏的）；濃硫酸或者乙醇-硫酸靠炭化發(fā)黑顯色，電爐加熱也是此原理；高錳酸鉀和磷鉬酸銨是無(wú)機(jī)物溶液顯色劑；以上是通用顯色劑。有苯環(huán)，芳環(huán)，多共軛鍵對(duì)紫外有強(qiáng)吸收，可用紫外光。

洗脫劑的極性可用薄層層析來(lái)確定，一般以待分離樣品Rf值為0.2-0.3為宜。選擇的洗脫劑應(yīng)該使兩相鄰物質(zhì)Rf值之差最大化。不要認(rèn)為在板上爬得高分離的效果就比較好，如果Rf在0.6，即使相差0.2也不容易在柱子上分開(kāi)，因?yàn)橹�子是一個(gè)多次爬板的過(guò)程，可以通過(guò)公式的比較：0.6/0.8一次的分離度，肯定不如（0.2/0.3）的三次方或四次方大。

有時(shí)雖然在薄層板上看到分離的效果很好，但過(guò)柱層析時(shí)還是很難分開(kāi)。這主要的原因就是薄層層析用硅膠比柱層析用硅膠要細(xì)得多，所以分離效果好。

解決的辦法就是降低洗脫劑的極性，一般柱層析用洗脫劑比薄層層析用的展開(kāi)劑極性要再降低一倍可以達(dá)到比較好的分離效果。當(dāng)所分離物質(zhì)極性跨度較大時(shí)，可用采梯度洗脫的方法，即逐漸增加溶劑的極性，使吸附在硅膠上的不同化合物逐個(gè)洗脫下來(lái)。

常用的展開(kāi)劑極性小的用乙酸乙酯：石油醚系統(tǒng)；極性較大的用甲醇：氯仿系統(tǒng)；極性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系統(tǒng)；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸。對(duì)于很難分離的化合物，一是增加柱子的長(zhǎng)度和直徑，二是減小洗脫劑的極性，這樣可以很好地將混合物分開(kāi)。

在同樣能洗脫的情況下，盡量使用毒性小的洗脫劑。例如，乙酸乙酯：石油醚系統(tǒng)和二氯甲?/p>

DMSO二甲基亞砜，溴化乙錠Ethidium bromide，二乙基焦碳酸酯（diethylprocarbonate），丙烯酰胺，二硫蘇糖醇，TEMED，PMSF苯甲基磺酰氟，氯仿（CHCl3），吉姆薩（Giemsa），十二烷基硫酸鈉（SDS），三氯乙酸（TCA），過(guò)硫酸銨[（NH4）2S2O8]，苯酚

在做分離分析鑒定時(shí)，會(huì)使用到薄層層析鑒定技術(shù)，而薄層層析硅膠板就是這其中的一個(gè)重要工具。在實(shí)驗(yàn)室，我們通常需要自己做硅膠板。由于網(wǎng)上介紹的相關(guān)技術(shù)五花八門(mén)但又不全面，所以小編根據(jù)自己的親身經(jīng)驗(yàn)寫(xiě)一篇介紹文章，來(lái)全面、細(xì)致的介紹如何制作薄層層析硅膠板。工具/原料熱水、CMC纖維素鈉鹽800~1200、薄層層析硅膠離心機(jī)、豆?jié){機(jī)、玻璃板、涂布器、恒溫水浴鍋、（超聲波清洗儀）方法/步驟1初步溶解CMC鈉鹽：先取1000ml水加熱至沸騰，再稱取8gCMC纖維素鈉鹽800~1200于一大錐形瓶中，將一部分沸水緩慢加入到錐形瓶中并且不斷用玻璃